树突状细胞（DC细胞）与T细胞之间的相互作用在肿瘤治疗中至关重要。研究表明，骨髓来源的DC细胞（BMDCs）能够诱导CD103+CD8+组织驻留记忆T细胞亚型的产生，从而增强生殖道局部肿瘤的控制能力。此外，半乳糖酸的阻断进一步提升了BMDCs诱导抗原特异性CD8+T细胞增殖的能力。全转录组基因表达分析显示，仿硅酸处理的BMDCs可诱导与T细胞活化、细胞粘附及细胞间相互作用相关的基因差异表达。细胞聚类分析和单细胞嗜性测量表明，糖基化降低的BMDC与CD8+T细胞之间形成了更加高效的相互作用。

DC细胞在完成抗原呈递后，在CD8+T细胞的激活及靶细胞的杀伤过程中发挥协同作用及调控功能。活化的CD8+T细胞记忆功能的分群变化与其细胞内乳酸化、棕榈酸化及相关代谢过程的关联是当前研究的重点。大多数研究需要评估CD8+T细胞的杀伤功能，本期小E将为大家提供DC细胞活化后CD8+T细胞的评估及其杀伤功能检测的解决方案。

实验原理简介

DC细胞是已知的功能最强的抗原呈递细胞（APC），能够摄取并消化外源抗原，同时将其加载在MHC分子上，以便向CD4+和CD8+T细胞呈递并激发免疫反应。共培养DC细胞和CD8+T细胞是模拟体内CD8+T细胞激活的理想方法，这使其成为CD8+T细胞相关研究不可替代的模型方案。具体来说，当表达抗原肽-MHCⅠ复合物的DC细胞与CD8+T细胞共培养时，CD8+T细胞通过其表面的T细胞受体（TCR）与DC细胞上的抗原肽-MHCⅠ复合物结合，从而被激活。活化的CD8+T细胞（也称为细胞毒性T细胞）可以通过释放溶解介质（如穿孔素和颗粒酶）对靶细胞进行杀伤，或通过与靶细胞Fas受体的结合，触发Caspase-8的激活，从而直接启动靶细胞的凋亡程序。

实验结果展示

在DC细胞的体外培养及促成熟过程中，流式细胞术检测显示，C57小鼠的骨髓细胞经过诱导培养后，MHCII/CD80/CD40/CD86的表达显著升高。此外，使用EasySort™MouseCD8+TCellIsolationKit从C57小鼠脾脏中分选出CD8+T细胞，并使用流式细胞术分析其细胞纯度。接下来，将灭活的靶细胞（Raw2647）抗原加载到DC细胞后，与分选的CD8+T细胞共培养72小时，以检测CD8+T细胞的增殖情况。

CD8+T细胞杀伤靶细胞的凋亡检测

增殖后的T细胞与靶细胞（Raw2647）按照1:10的比例共培养24小时，通过流式细胞术检测靶细胞（Raw2647）中Caspase3酶活性的变化。共培养组的Raw2647细胞Caspase3酶激活比例显著增加，与Control组正常的靶细胞（Raw2647）进行比较，发现其比例增加至7944%。另外，通过ELISA检测细胞培养上清中的细胞因子表达，结果显示共培养组（Test）的细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α的表达显著高于Control组。

实验方案及操作流程

为了获得成熟的DC细胞，首先需从小鼠骨髓中提取细胞，并使用分化培养基培养6天，随后在成熟培养基中继续培养24小时。详细操作流程可参考“Mouse Bone Marrow-derived Dendritic Cells (BMDC) Induction and Identification Kit”（货号：XJM003）。同时，对Raw2647细胞进行灭活处理，并与成熟的BMDC以1:1的比例共培养24小时。

随后，从C57小鼠脾脏细胞中分选CD8+T细胞，并进行标记和共培养，以监测细胞行为。共培养结束后，细胞经过洗涤和分析，评价其在靶细胞凋亡中的作用。若有任何实验内容方面的细节需要了解，请随时与我们的技术团队联系，点击88858cc永利官网，获取更多信息。

本实验方案全程采用88858cc永利官网相关产品，确保实验的高效及精准。产品主要包括：

• Mouse Bone Marrow-derived Dendritic Cells (BMDC) Induction and Identification Kit（货号：XJM003）
• EasySort™-5 Magnet（货号：EC001）
• EasySort™Mouse CD8+T Cell Isolation Kit（货号：MIM003N）
• ...（其余产品信息）

更多参考

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